Le contrôle des anabolisants dans la viande

The survey of anabolic agents in meat

LDH/NR École Nationale Vétérinaire - BP 50707 - 44307 NANTES Cedex 3 Tél : 02 40 68 77 66 - Fax : 02 40 68 78 78

Reçu : 10 Décembre 1999
Accepté : 7 Janvier 2000

Résumé

Le contrôle de l'usage de substances interdites en élevage est organisé et réglementé au niveau européen. Il est basé le plus souvent sur la recherche des molécules prohibées ou encore de leurs metabolites chez l'animal, dans leurs excréta, voire dans tout tissu pouvant être prélevé. Néanmoins, dans certaines situations particulières, viandes foraines ou d'importation par exemple, le seul moyen de contrôle efficace est la mise en évidence directe de la substance interdite dans la viande elle-même. C'est la raison pour laquelle, une méthode permettant la recherche simultanée dans la viande (ou le foie) de nombreux composés anabolisants interdits a été développée au sein du Laboratoire National de Référence (LDH/LNR) (Ministère de l'Agriculture et de la Pêche), conformément aux exigences de la directive 96/23 EC. La procédure analytique consiste tout d'abord en la lyophilisation du tissu prélevé avant extraction liquide-liquide. Deux hydrolyses successives autorisent respectivement la déconjugaison des metabolites de phase 11 (sulfates, glucuronides) et la saponification des esters de stéroïdes. Après partage des analytes en deux sous familles, les androgènesprogestagènes et les phénolstéroïdes, deux étapes d'extraction en phase solide (SPE NH₂ et SiOH) permettent la purification des analytes. Une réaction spécifique de dérivation est dédiée à chacune des quatre sous familles de promoteurs de croissance extraites. L'identification de 23 anabolisants différents est assurée en associant chromatographic en phase gazeuse et spectrométrie de masse, basse et haute résolution. Les limites de détection pour l'ensemble des analytes sont comprises entre 5 et 100 ng/kg (ppt).

Abstract

The survey of the illegal use of banned drugs including anabolic agents in food producing animals is regulated in the European Union. The compounds are usually looked for in animal feed, in urine or feces or in any animal tissue which may be easily sampled such as hair for example. However, in some cases, for retail or imported meat, the survey has to be performed by direct assay in the meat itself. A method has been developed in the National Reference Laboratory for hormones (French Ministry of Agriculture) in order to assay simultaneously various anabolic agents according to the requirements of EC 96/23 Directive for meat (or liver) control. The meat sample is firstly lyophilised and extracted with organic solvents ; phase II metabolites are hydrolysed and esters are saponified. Free compounds are extracted again thanks to various liquid-liquid and solid phase extraction. The method allow the final identification of 23 various anabolic agents by gas chromatography coupled to mass spectrometry, either in the low and the high resolution mode detection levels are in the 5 and 100 ng.kg^-1 range.