Détermination des concentrations physiologiques de la norandrostérone et de la norétiocholanolone, métabolites urinaires de la nandrolone par CPG/SM. Résultats d'une étude multicentrique

Determination of physiological concentrations of norandrosterone and noretiocholanolone, urinary metabolites of nandrolone by GC/MS. Results of a multicentric study

¹ Laboratoire de Biochimie et de Biologie Moléculaire, CHR et U de LILLE
² Laboratoire d'Expertise TOXLAB, PARIS
³ Laboratoire de Police Scientifique de LILLE
⁴ Service de Pharmacologie-Toxicologie, CHR et U de LIMOGES
⁵ Laboratoire de Toxicologie, Préfécture de PARIS
⁶ Institut de Médecine Légale, STRASBOURG

Reçu : 6 Décembre 1999
Accepté : 14 Janvier 2000

Résumé

La nandrolone (19-Nortestostérone, 17 β-hydroxyestr-4-en-3one) stéroïde anabolisant est une substance dopante qui augmente la masse musculaire, accroît la résistance à l'effort et diminue le temps de récupération entre les efforts, elle est utilisée à la fois chez l'homme et l'animal. Les deux principaux métabolites urinaires de la nandrolone sont les dérivés glucuronoconjugués de la 19-norandrostérone et de la 19-norétiocholanolone. La limite de positivité à la nandrolone, basée sur la quantification urinaire de la 19-norandrostérone, proposée par le Comité International Olympique est de 2 ng/mL. Des résultats supérieurs à 2 ng/mL amènent quelquefois les athlètes à contester les résultats, niant la prise de cette substance. La question d'une production endogène des metabolites de la nandrolone s'est posée, puisque plusieurs études ont montré que, dans certaines conditions physiologiques ou pathologiques, on pouvait retrouver ces metabolites dans l'urine des sujets. Une étude multicentrique a été réalisée par la SFTA sur les concentrations physiologiques des metabolites de la nandrolone dans les urines humaines. Les échantillons ( 160) ont été obtenus auprès d'hommes sportifs ou non, issus de la population normale. Après extraction, hydrolyse par la fi-glucuronidase, purification, les analytes ont été silylés. L'identification et la quantification de la 19-norandrostérone et de la 19-norétiocholanolone ont été réalisés par chromatographic en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse. A partir de ces 160 échantillons, il a pu être démontré chez certains individus, une sécrétion physiologique des metabolites de la nandrolone. En général, les concentrations obtenues sont inférieures à 0,5 ng/mL, sous le seuil de positivité proposée par le C.I.O. Aucun des sujets étudiés ne présentait des concentrations urinaires des metabolites de la nandrolone supérieures à 1 ng/mL. La sécrétion physiologique de la nandrolone est donc faible, mais pas inexistante. La limite de positivité proposée par le C.I.O. semble donc donner des garanties suffisantes pour une population normale. Cependant on ne peut exclure la présence de nandrolone qui se trouverait dans la viande consommée par les sportifs, ni la prise d'autres substances comme des précurseurs stéroïdiens, tels que les 19 norstéroïdes qui pourraient entraîner l'apparition des mêmes metabolites dans les urines.

Abstract

Nandrolone (19-nortestosterone, 17 β-hydroxyestr-4-en-3one) anabolic steroid is a doping agent used to improve muscular strenght and performance, in sport and horse racing. Two main metabolites, 19-norandrosterone and 19-noretiocholanolone are excreted as glucuronides in urines. Official doping analysis of illicit nandrolone administration is based on the detection of 19-norandrosterone above a provisional decision limit of 2 ng/mL. Values higher than 2 ng/mL were contested by several athletes, whe denied anabolic steroids doping. Endogeneous formation of is dicussed, as several studies showed that in some physiological or pathological conditions, the two metabolites could be found in urines. A study about the physiological concentrations of nandrolone in human urine has been performed by The French Society of Analitycal Toxicology. 160 samples of urine collected from men were analyzed. After extraction, enzymatic hydrolysis by β-glucuronidase, purification and silylation, the derivatized steroids were analysed by gas chromatography/mass spectrometry. From 160 tested urinary samples, a physiological excretion of nandrolone metabolites is showed. Often concentrations are below 0.5 ng/mL, clearly under the proposed CIO positive cut-off (2ng/mL). Endogeneous formation was established. However, metabolites of nandrolone coud be also found after consumption of meat generated from nandrolone treated animals, or after ingestion of steroid precursors, as 19-norsteroids.