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Dosage des opiacés, de la cocaïne, des dérivés amphétaminiques et de leurs métabolites dans le sang total par SPE-UPLC/MS/MS

Determination of opiates, cocaine, amphetamine derivatives, and their metabolites in whole blood by solid-phase extraction and UPLC/MS-MS

¹ Laboratoire Toxicologie et Génopathies, Centre de Biologie-Pathologie-Génétique, CHRU de Lille, 59000 Lille Cedex, France
² Waters SAS, BP 608, 78056 Saint-Quentin-en-Yvelines, France
³ UDSL, Université Lille Nord de France, 59000 Lille, France

^⋆ Camille Richeval, camille.richeval@chru-lille.fr

Reçu : 2 Septembre 2011
Accepté : 4 Novembre 2011

Résumé

Objectif : Développer une méthode de préparation d’échantillons et de quantification simultanée des opiacés, des dérivés amphétaminiques, de la cocaïne et de leurs métabolites dans le sang total par SPE-UPLC/MS-MS. Méthode : 200 μL de sang total préalablement déprotéinisés sont extraits sur cartouches Oasis^® MCX (SPE). Les échantillons sont analysés sur une colonne Acquity UPLC^TM BEH C₁₈, 1,7 μm (2,1  ×  100 mm) éluée par un gradient d’acide formique 0,1 % et d’acétonitrile. Les composés sont détectés au moyen d’un spectromètre de masse en tandem en utilisant deux transitions (MRM). Résultats : La méthode développée est sensible et linéaire de 1 à 500 ng/mL pour l’ensemble des molécules avec une précision inter et intra-séries (CV <20 %). Les limites de détection varient de 0,17 à 2,07 ng/mL selon les composés. Conclusion : Une méthode de préparation d’échantillons couplée à l’UPLC/MS-MS est développée pour identifier et quantifier simultanément trois familles de stupéfiants dans le sang total. Cette méthode rapide et sensible est une bonne alternative aux méthodes de chromatographie en phase gazeuse qui nécessitent une dérivation supplémentaire lors du prétraitement.

Abstract

Objective: To develop a UPLC/MS-MS method for the simultaneous determination of opiates, cocainics and amphetamines. Method: After deproteinization, 200 μL of whole blood are extracted on Oasis^r MCX cartridges. Samples are analyzed on an Acquity UPLC^TM column, BEH C₁₈, 1.7 μm (2.1  ×  100 mm) eluted by a gradient of 0.1% formic acid and acetonitrile. Detection is achieved by tandem mass spectrometry operating in multiple reactions monitoring (MRM) mode. Two transitions are monitored for each compound. Results: The method is linear over the range 1–500 ng/mL with inter- and intra-assay precision (CV<20%). The detection limit ranges from 0.17 to 2.07 ng/mL depending on the analyte. Conclusion: A SPE-UPLC/MS-MS method was developed to identify and quantify 3 classes of illicit drugs in whole blood.