Évaluation du dépistage de quatre classes de stupéfiants et des benzodiazépines dans le sang total laqué par l'analyseur Evidence Investigator^®

Evaluation of screening for drugs of abuse and benzodiazepines in forensic blood samples using Evidence Investigator^™ analyser

Laboratoire de Pharmacologie - Toxicologie, Centre Hospitalier Universitaire Raymond Poincaré, AP-HP, 104 boulevard Raymond Poincaré, 92380 Garches, France

Auteur de correspondance : jean-claude.alvarez@rpc.aphp.fr

Reçu : 22 Novembre 2007
Accepté : 18 Février 2008

Résumé

Introduction : L'objectif de ce travail a été d'évaluer la détection semi-quantitative de 4 classes de stupéfiants (opiacés, cocaïne, cannabinoïdes et amphétamines) et des benzodiazépines dans du sang total laqué par l'analyseur Evidence Investigator. 128 échantillons contenant au moins une molécule de ces familles, dosée par une technique de chromatographie couplée à la spectrométrie de masse, ont été analysés. Résultats et discussion : La spécificité de cette méthode a été de 79,0 % pour les amphétamines, 98,1 % pour les cannabinoïdes, et 100 % pour les opiacés, la cocaïne, et les benzodiazépines. La sensibilité a été de 33,3 % pour les amphétamines, 78,4 % pour les benzodiazépines, 93,2 % pour les cannabinoïdes, 93,5 % pour les opiacés et 95,2 % pour la cocaïne. 3,9 % de faux négatifs ont été relevés toutes classes confondues, dus notamment à des analytes présents en faible concentration ou mal reconnus par les anticorps. Les 4,0 % de faux positifs ont été majoritairement observés durant la détection des amphétamines, probablement en raison de la présence d'amines biogènes, comme cela a déjà été rapporté dans la littérature. Une amélioration a pu être apportée à cette technique, en ajoutant un lavage supplémentaire pendant la préparation des échantillons (meilleure qualité de l'image obtenue après lecture par la caméra). Une optimisation des valeurs des seuils de positivité est envisageable pour réduire la proportion de faux négatifs durant la détection des benzodiazépines et des cannabinoïdes. Conclusion : Cette méthode d'immunoanalyse permet une détection satisfaisante des opiacés, de la cocaïne, des cannabinoïdes et des benzodiazépines, l'identification formelle et la quantification devant cependant être effectuées par des techniques de référence (spectrométrie de masse), notamment en médico-légal.

Abstract

Introduction: Semi-quantitative detection of 4 classes of drugs of abuse (opiates, cocaine, cannabinoids and amphetamines) and benzodiazepines in haemolysed whole blood by Evidence Investigator analyser has been evaluated in this study. 128 forensic blood samples known to be positive for at least one of these classes by chromatography coupled to mass spectrometric detection were analysed. Results and discussion: Specificity was 79.0% for amphetamines, 98.1% for cannabinoids, and 100% for opiates, cocaine, and benzodiazepines. Sensitivity was 33.3% for amphetamines, 78.4% for benzodiazepines, 93.2% for cannabinoids, 93.5% for opiates and 95.2% for cocaine. 3.9% of false negatives were observed all classes taken together, due to low concentrations of analytes or due to a bad recognition of some analytes by antibodies. The 4.0% of false positive results were predominantly observed during amphetamines detection, probably due to presence of biogen amines, as it has previously been reported. An improvement of the technique has been carried out by adding a supplementary wash step during sample preparation. An optimisation of cutoff levels is possible to reduce false negative results during benzodiazepines and cannabinoids detection. Conclusion: This immunoanalytical method enables an efficient detection of opiates, cocaine, cannabinoids and benzodiazepines in forensic blood samples. However a further confirmation and quantification by mass spectrometry techniques remains necessary.