Molécules indétectables par chromatographie en phase gazeuse

Undetectable molecules in gas chromatography

Service de Toxicologie et Génopathies, CHRU de Lille - 59037 LILLE

Auteur de correspondance : l-humbert@chru-lille.fr

Reçu : 16 Février 2005
Accepté : 2 Avril 2005

Résumé

La chromatographie en phase gazeuse (CPG) et la chromatographie liquide de haute performance (CLHP) sont les deux méthodes séparatives les plus employées dans les laboratoires de toxicologie. La CLHP possède un avantage important, elle permet de séparer n'importe quel type de molécule à condition qu'elle soit soluble. La CPG est destinée aux substances volatiles, leurs détections sont possibles grâce à un grand nombre de détecteurs très sensibles (ionisation de flamme, thermoionique, capture d'électrons, ...), elle est couplable très aisément à un spectromètre de masse sans avoir recours à une interface. L'une des limitations majeures de la CPG tient à la faible volatilité d'un grand nombre de molécules due soit à un haut poids moléculaire (en général > 500 Da) ou à leur capacité à créer des liaisons dipôle-dipôle ou hydrogène qui élèvent de façon importante leur point d'ebullition. Pour rendre détectable certaines d'entre elles il est possible de modifier leur nature physicochimique en réalisant l'une des nombreuses méthodes de dérivations existantes qui permettent par greffage d'un groupement chimique d'abaisser leur point d' ebullition, Il existe en outre une thermolabilité de certaines molécules en présence de la température élevée de l'injecteur. Il est parfois possible d'atténuer les problèmes de thermodénaturation de certains composés en utilisant une injection de type "on column" qui introduit directement l'échantillon en tête de colonne analytique sans le vaporiser: Cet article détaille certains des aspects théoriques et explique certains des mécanismes qui inter-viennent dans l'analyse par CPG.

Abstract

Gas chromatography (GC) and high performance liquid chromatography (HPLC) are the two separative methods most employed in the laboratories of toxicology. The HPLC Iras a significant advantage, it makes it possible to separate any type of molecule provided that it is soluble. The GC is intendedfor the volatile substances, their detections are possible with to a great number of very sensitive detectors (flame ionization, thermionic, electron capture...), it is connecting very easily with a mass spectrometer without having use to an interface. One of the major limitations of the CPG is due to the low volatility of a great number of molecules due by a high molecular weight (in general > 500 Da) or with their capacity to create links dipole-dipole or hydrogen which raise in a significant way their point of boiling. To make detectable some of them it is possible to modify their physico-chemical nature by carrying out one of the many methods of existing derivations which make it possible by grafting of a chemical group to lower their point of boiling. There is moreover a thermolability of some molecules in the presence of the high temperature of the injector: It is also possible to attenuate the problems of thermodénaturation of some compounds by using an injection of the type "on column" which directly introduces the sample at the head of column analytical without vaporizing it. This article details some of the theoretical aspects and explains some of the mechanisms which interyene in the analysis by CPG.