Le contrôle antidopage des animaux, nouvelles perspectives, nouvelles méthodes

Animal doping control new aspects, new methods

L.A.B.-F.N.C.F., 169, avenue de la division Leclerc - 92290 CHATENAY MALABRY

Reçu : 2 Décembre 1999
Accepté : 13 Janvier 2000

Résumé

Les nouvelles méthodes de détection pouvant être mises en place dans les laboratoires sont principalement axées autour des spectromètres de masse de haute résolution, notamment les appareils de temps de vol (TOF) dont la technologie s'est considérablement améliorée ces dernières années. Ces techniques sont susceptibles d'apporter à la fois une meilleure sensibilité et spécificité. En effet l'accroissement de résolution permet d'augmenter significativement le rapport signal/bruit et dans la mesure où la sensibilité de l'appareil n 'est pas altérée en conséquence, le gain en terme de capacité de détection est donc important. Dans le même esprit, de nouveaux couplages de chromatographie liquide capillaire/ MS/MS, alliant à la fois la résolution chromato graphique des colonnes "micro ou nanobore" aux performances des spectromètres en tandem (MS/MS) récents ou des trappes d'ions permettent d'améliorer significativement les limites de détection des xénobiotiques dopants. Des exemples de détection de stéroïdes anabolisants dans les milieux biologiques équins illustrent ces nouvelles perspectives analytiques. Le second axe de développement s'articule autour de la prise en compte de marqueurs biologiques qui peuvent être altérés par l'administration de biomolécules telles que les hormones de croissance par exemple. Le problème principal posé par l'administration de ces peptides réside dans le fait que ces molécules elles-même sont difficiles à détecter du fait de leur poids moléculaire élevé et surtout par le fait que leur demi-vie est très courte. Ces deux phénomènes ont pour conséquence de rendre aléatoire la mise en évidence de la molécule elle-même, une solution possible à cela consiste à prendre en compte les marqueurs biologiques altérés par l'administration de l'hormone protéique. Ainsi un exemple basé sur le suivi de ces marqueurs et en particulier de l'IGFl, après administration d'hormone de croissance recombinante au cheval est exposé.

Abstract

Dope testing laboratories need improved sensitivity for some specific drugs such as anabolic steroids. New generation high resolution mass spectrometers, such as Time Of Flight (TOF) or even magnetic sectors systems, can improve dramatically the sensitivity of detection by improving the signal to noise ratio through increase of resolution without decrease of sensitivity. In the same spirit micro or nanobore capillary liquid chromatography coupled with MS/MS (quadrupoles or ion trap ) can lower significantly the limit of detection of some drugs. Examples involving anabolic steroid detection in horse urine are shown. Another extension of the dope testing concept needs to be taken into account. Biological macromolecules such as erythropoietin (EPO) or growth hormone (GH) can be monitored by their endogenous markers. The half-life of such peptides is so short that their detection in biological fluids remains uncertain. Therefore, the monitoring of such molecules is far more easier by analysing the effect on the biomarkers, significantly altered by the drug. An example of the variation of plasmatic IGF1 by administration of recombinant GH in the horse is given.