Étude du comportement analytique de la mirtazapine en chromatographie liquide haute performance et électrophorèse capillaire de zone

Analytical behaviour of mirtazapine in high performance liquid chromatography and capillary zone electrophoresis

¹ Laboratoire de Chimie Analytique, UFR de Pharmacie, 3, place de la Victoire - 33076 BORDEAUX Cedex
² Institut de Médecine Légale, Place Théo Varlet - 59000 LILLE

Reçu : 9 Mai 2001
Accepté : 29 Mai 2001

Résumé

La mirtazapine est un antidépresseur de nouvelle génération, antagoniste des récepteurs α₂ présynaptiques d'action centrale, permettant l'augmentation de la neurotransmission noradrénergique et sérotoninergique. L'identification et le dosage dans les milieux biologiques de cette molécule et de son metabolite actif, la déméthylmirtazapine, peuvent être réalisés par chromatographie liquide haute performance (CLHP) et par électrophorèse capillaire de zone (ECZ). La mirtazapine possède deux fonctions amine de propriétés acido-basiques très différentes. Le pKa du groupement amino-2-pyridine est de 3,60 ± 0,05, et celui de la fonction amine tertiaire, de 7,50 ± 0,05. Nous avons étudié l'incidence de ces constantes d'ionisation sur le comportement analytique de la mirtazapine parmi les antidépresseurs de nouvelle génération, dans le cadre du développement de méthodes de séparation en CLHP et en ECZ. Nous présentons la séparation d'un mélange de 12 antidépresseurs, dont la mirtazapine et la déméthylmirtazapine, en CLHP sur une colonne Satisfaction® RP 18 AB maintenue à 45° C avec une phase mobile acétonitrile/tampon pH 4,8 (35 : 65, v/v). En ECZ, la séparation a été optimisée à 15° C sur un capillaire en silice fondue conditionné par un tampon borate 42 mM (pH 9,5) et méthanol (80 : 20, v/v) et une tension appliquée de 15 kV. En CLHP, nous avons mis en évidence l'influence particulièrement importante du pH de la phase mobile (pH 3 à pH 4,95) et de la température (25° C à 50° C) sur les temps de rétention de la mirtazapine et de son metabolite. En ECZ, le pH du tampon de migration (entre pH 9,2 et pH 9,9) a une influence homogène sur la migration de l'ensemble des antidépresseurs, tous faiblement ionisés dans ces conditions. Les comportements analytiques de la mirtazapine et de la déméthylmirtazapine sont donc très dépendants des variations de pH dans des zones proches des deux pKa.

Abstract

Mirtazapine is a new antidepressant, antagonist of central α₂ presynaptic receptors, and thus increases the release of noradrenaline and serotonin. Determination in biological fluids of mirtazapine and déméthylmirtazapine, the pharmacologically active metabolite, can be performed by high performance liquid chromatography (HPLC) and capillary zone electrophoresis (CZE). Mirtazapine has two amino groups with different acido-basic properties. The pKa of the amino-2-pyridine group was found to be 3.60 ± 0.05 and the pKa of the tertiary amine group, 7.50 ± 0.05. We studied the influence of these acidobasic characteristics on the analytical behaviour of mirtazapine among other new antidepressants, in developing HPLC and CZE separative technics. We performed the separation of twelve antidepressants, including mirtazapine and déméthylmirtazapine, by HPLC on a Satisfaction® RP 18 AB column at 45° C with a mobile phase composition of acetonitrile/phosphate buffer pH 4.8 (35 : 65, v/v). In CZE, we optimized the separation at 15° C on a fused silica capillary with a migration buffer consisting of borate buffer 42 mM (pH 9,5) and methanol (80 : 20, v/v), and an applied voltage of 15 kV. In HPLC, we pointed out the major effect of the pH of the mobile phase (pH 3 to pH 4.95) and of the temperature (25° C to 50° C) on mirtazapine and déméthylmirtazapine retention times. In CZE, the pH of the migration buffer (pH 9.2 to pH 9.9) has a similar and minor effect on all the antidepressant molecules migration, weakly ionized in these conditions. In conclusion, the analytical behaviours of mirtazapine and déméthylmirtazapine are very dependent of pH changes in pH zones near the two pKas.