Dosage par chromatographie liquide haute performance de la luméfantrine sur spot de sang séchéLiquid chromatographic assay for the lumefantrine quantification on dried blood spot

Free access article

Issue		Ann Toxicol Anal Volume 21, Number 3, 2009


Page(s)		147 - 154
DOI		10.1051/ata/2009049
Published online		10 July 2009

Ann Toxicol Anal. 2009; 21(3): 147-154
DOI: 10.1051/ata/2009049

Dosage par chromatographie liquide haute performance de la luméfantrine sur spot de sang séché

Jennifer Wong¹, Isabelle Souletie¹, Jean François Faucher^{2, 3} et Pascal Houzé¹

¹ Laboratoire de Biochimie, Hôpital St Louis, 1 avenue Claude Vellefaux, 75010 Paris, France
² Institut de Recherche pour le développement ; Mother and Child Health in the Tropics Research Unit, 08BP841 Cotonou, Benin
³ Departement des maladies infectieuses, CHU de Besançon, 25030 Besançon Cedex, France

Reçu le 15 décembre 2008, accepté après modifications le 4 mai 2009 / Publication en ligne le 10 juillet 2009

Abstract - Liquid chromatographic assay for the lumefantrine quantification on dried blood spot
Aim: Lumefantrine is a new anti-malarial drug used in association with artemeter in the treatment of uncomplicated Plasmodium falciparum malaria in children. Poor absorption of lumefantrine needs to monitor concentrations to identify the nature of the therapeutic failure. We have developed the determination of lumefantrine on dried blood spots, which are frequently used to collect and store blood in hard conditions. Methods: Lumefantrine measurement was assayed by liquid chromatography after liquid-liquid extraction procedure using ethyl acetate/acetic acid as solvent. Separation was performed on a Xbridge $^{\circledR}$ column using ammonium acetate pH 4 / acetonitrile (10/90 v/v) in isocratic mode. UV detection was set at 335 nm using tocol as internal standard. Results: Lumefantrine and internal standard are eluted at 7.1 and 10.3 min, respectively. The method is linear from 250 to 5000 $\mu$ g/L with a good sensitivity corresponding to 85 $\mu$ g/L for limit of detection and 250 $\mu$ g/L as limit of quantification. Precision (below 10%) and accuracy (below 10%) are satisfying. Lumefantrine concentrations were stable in dried blood spot during 10 days at +4 °C but a significant decrease was observed at +25 °C. Blood residual concentrations in children treated by lumefantrine during 3 days were 490 $\pm$ 152 $\mu$ g/L. Conclusion: We have developed a specific and accurate method to measure lumefantrine in dried blood spot available to realise pharmacologic or epidemiologic studies.

Résumé
Objectif : La luméfantrine, est un nouvel antipaludéen de synthèse utilisé en association avec l'artéméter dans le traitement de l'accès palustre simple chez l'enfant. Sa mauvaise biodisponibilité impose un suivi des concentrations circulantes pour identifier les échecs thérapeutiques qui sont dus à une mauvaise absorption de ceux qui résultent d'un phénomène de résistance. Nous avons développé le dosage de la luméfantrine sur spot de sang séché, support adapté au prélèvement et au stockage des échantillons dans des conditions difficiles. Méthodes : Le dosage de la luméfantrine a été réalisé par chromatographie liquide après extraction liquide-liquide des spots par le mélange acétate d'éthyle/acide acétique. La séparation est réalisée sur colonne Xbridge $^{\circledR}$ avec une phase acétate d'ammonium pH 4 / acétonitrile (10/90 v/v) en mode isocratique. La détection est réalisée en UV à 335 nm, avec le tocol comme étalon interne. Résultats : La luméfantrine et l'étalon interne sont élués en respectivement 7,1 et 10,3 minutes. La méthode est linéaire entre 250 et 5000 $\mu$ g/L. La limite de détection est de 85 $\mu$ g/L avec une limite de quantification à 250 $\mu$ g/L. La précision est satisfaisante (< 10 %), de même que l'exactitude (biais < 10 %). Les spots sont stables à +4 °C pendant 10 jours, mais une conservation à +25 °C, s'accompagne d'une baisse significative des concentrations. Les concentrations résiduelles chez des enfants traités 3 jours par la luméfantrine sont de 490 $\pm$ 152 $\mu$ g/L. Conclusion : Nous rapportons une méthode robuste et fiable de dosage de la luméfantrine sur spots de sang séché applicable aux études pharmacocinétiques et épidémiologiques.

Key words: Lumefantrine -- HPLC -- dried blood spot

Mots clés : Luméfantrine -- CLHP -- spot de sang séché

What is OpenURL?

The OpenURL standard is a protocol for transmission of metadata describing the resource that you wish to access. An OpenURL link contains article metadata and directs it to the OpenURL server of your choice. The OpenURL server can provide access to the resource and also offer complementary services (specific search engine, export of references...). The OpenURL link can be generated by different means.

If your librarian has set up your subscription with an OpenURL resolver, OpenURL links appear automatically on the abstract pages.
You can define your own OpenURL resolver with your EDPS Account. In this case your choice will be given priority over that of your library.
You can use an add-on for your browser (Firefox or I.E.) to display OpenURL links on a page (see http://www.openly.com/openurlref/). You should disable this module if you wish to use the OpenURL server that you or your library have defined.